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免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-phospho-PRKCA(Thr637)
中文名稱  磷酸化蛋白激酶C抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat 
產(chǎn)品類型     一抗 磷酸化抗體
別    名  PRKCA(phospho T637); rotein Kinase C; AAG6; Aging associated gene 6; MGC129900; MGC129901; MGC41878; MGC57564; PKC B; PKC beta; PKC zeta; PKC2; PKCB; PKCC; PKCD; PKCE; PKCG; PRKACA; PRKC A; PRKC G; PRKCA; PRKCB; PRKCB1; PRKCB2; PRKCD; PRKCE; PRKCG; PRKCZ ; Protein kinase C alpha; Protein kinase C alpha type; Protein Kinase C; Protein kinase C beta 1; Protein kinase C beta 1 polypeptide; Protein kinase C beta; Protein kinase C beta type; Protein kinase C delta; Protein kinase C epsilon; Protein kinase C gamma; Protein kinase C gamma type; Protein kinase C zeta; SCA14; Spinocerebellar ataxia 14.
研究領域    免疫學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 153kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PRKCA around the phosphorylation site of Thr637
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產(chǎn)品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經(jīng)常使用的抗原有：偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物）刺激機體產(chǎn)生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：
（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或?qū)е隆Ｈ欢?，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
紫脲酸銨質(zhì)量規(guī)格：ACSMurexide  ELISAKitsEPCR人可溶性內(nèi)皮細胞蛋白C受體規(guī)格：48T/96T  倉鼠白介素6(IL-6)試劑盒 Hamster Ierleukin 6,IL-6 ELISA Kit

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